Servicios:

• Seccionado de muestras congeladas.
• Selección de estructuras tisulares mediante microdisección láser.
• Microscopía de fluorescencia convencional.
• Microscopía "widefield" multidimensional (equipada para captación de mosaicos y experimentos en vivo).
• Microscopía confocal (disponible tanto para muestras fijadas como para experimentos con células vivas).

El personal de la UAT ofrece formación en el uso autónomo del equipamiento, asistencia durante la realización de las técnicas experimentales, así como apoyo en el diseño experimental y en la interpretación y análisis de las imágenes.

Puedes contactar con nosotros en microscopia@vhir.org.

Aplicaciones: 

• Preparación de las muestras:
  • Seccionado preciso de tejido congelado (criostato) para las posteriores tinción y observación.
  • Aislamiento y recuperación de las estructuras celulares y subcelulares mediante microdisección láser.
• Aplicaciones generales de microscopía de campo amplio:
  • Análisis de las características estructurales y morfológicas de las células y los tejidos. En concreto, el microscopio multidimensional Thunder permite:
    • Adquisición "time-lapse" para la formación de imagen de células vivas (dinámica lenta y rápida).
    • Adquisición multidimensional: adquisiciones en serie multicanal [XYZ tn].
    • Adquisición rápida y reconstrucción de mosaicos, útiles en el caso de muestras de tamaño grande.
    • Método de aclaración computacional: generación de imágenes de alta resolución/alto contraste de muestras gruesas con la eliminación instantánea de la difuminación de la imagen por desenfoque.
• Aplicaciones de microscopía confocal (in vitro/in vivo):
  • Análisis lineal de mezclas espectrales en muestras etiquetadas con varios fluorocromos.
  • Estudios funcionales de la dinámica celular (in vivo): endocitosis, flujos de calcio, contracción celular, ciclo celular, etc.
  • Análisis de colocalización, con una opción de formación de imagen de alta resolución especialmente útil (resolución lateral de hasta 120 nm).
  • Reconstrucción de estructuras tridimensionales (cortes gruesos de tejido, esferoides, organoides) con imágenes de adquisición de mosaico de alta resolución (XY) y pilas Z.
  • "Contaje de cribado alto" para estudios cuantitativos o de colocalización den que se requiere información estadística y alta resolución.
  • Análisis de alta resolución de estructuras subcelulares, exosomas.
  • Formación de imagen de nanopartículas.

Equipamiento:

• Preparación de las muestras:
  • Criostato Leica CM3050. Seccionado preciso (de 0,5 a 300 μm) de muestras congeladas (en autoservicio).
  • Sistema de microdisección láser Leica LMD 6000. Especificaciones técnicas disponibles aquí.
• Microscopía de fluorescencia convencional combinada con cámeras digitales y programario de adquisición de imágenes.
  • Microscopio vertical Olympus BX61 (para portaobjetos). Especificaciones técnicas disponibles aquí.
  • Microscopio invertido Leica DM-IRB (para cultivos celulares/portaobjetos). Especificaciones técnicas disponibles aquí.
• Microscopio "widefield" multidimensional Thunder Imager 3D Cell Culture (Leica).
  • Principales aplicaciones: captación de dinámicas temporales en células vivas, de mosaicos y adquisición de muestras tridimensionales con procesamiento instantáneo de la señal fuera del foco y/o deconvolución. Especificaciones técnicas disponibles aquí.
• Microscopía confocal:
  • Microscopio confocal espectral Olympus FV1000 (Olympus). Especificaciones técnicas disponibles aquí.
  • Microscopio confocal espectral Zeiss LSM980 equipado con detector espectral de 32 canales, detector de superresolución AiryScan 2 y sistema de incubación para experimentos en vivo. Especificaciones técnicas disponibles aquí.
• Tres estaciones de trabajo fuera de línea para la visualización y el procesamiento de imágenes, accesibles tanto presencialmente como de forma remota. Se ofrece programario de código abierto (Image J/Fiji) y programari comercial genérico (Imaris), así como específico de diferentes casas comerciales (Olympus Fluoview, Zeiss ZEN y Leica LAS X, con diferentes módulos de análisis).